ACIDES AMINES METHODE D'ETUDE

DR Batman

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00:00:00 Salut les gens, c'est parti alors, pour la vidéo d'aujourd'hui, ce que nous allons faire, nous allons faire les méthodes d'études des assieds aminés.

00:00:10 Donc bon, pour faire ce cours, c'est très simple.

00:00:15 Mais nous allons y arriver.

00:00:17 Pour faire le cours des méthodes d'études des assieds aminés, il faut savoir deux choses essentielles.

00:00:22 Ce sont les méthodes chromatographiques, le principe de la chromatographie et le principe de l'électrophorese.

00:00:30 Ce sont les bases des méthodes témoignons.

00:00:33 On peut classer les méthodes d'études témoignons des assieds aminés avec deux classifications.

00:00:40 Soit on va classifier selon la propriété que nous allons utiliser pour départager ou départager les aminés témoignons.

00:00:48 Donc ici, faites le diapo, c'est ce qui a été mis. Donc on va départager les méthodes témoignons.

00:00:53 Selon est-ce que la méthode est basée sur la solubilité de l'acide aminé, c'est-à-dire à quel point il doble en solvant.

00:01:01 Et la méthode est basée sur quelle propriété, sur la charge.

00:01:08 On a étudié les propriétés ou la définition des assieds aminés, mais ce sont des molécules qui peuvent être chargées, soit positivement, soit négativement.

00:01:16 Grâce à leur fonction amine NH2 qui va devenir NH3+, et leur fonction carboxylique COOH qui va devenir COO-.

00:01:26 Comme je vous ai dit, il y a une autre classification.

00:01:29 On peut classifier les méthodes selon est-ce que c'est une méthode chromatographique.

00:01:33 Et ici, on a mis "Galiméthode chromatographique".

00:01:36 Mais comme je l'ai déjà envoi, c'est le même principe, mais le support va être différent.

00:01:41 On a les méthodes chromatographiques qui sont chromatographiques sur papier, couche mince, CCM, en phase gazeuse, échangeuse d'ion et HPLC.

00:01:52 Mention spéciale pour les trois dernières, HPLC, échangeuse d'ion et phase gazeuse, qui sont des chromatographies sur colonne.

00:02:00 On va voir ça plus tard, on va détailler la chromatographie sur colonne qui fèche derrière.

00:02:07 Comme je vous l'ai dit, ce cours ne fait vraiment pas de sens.

00:02:11 Il y a deux principes qu'il faut comprendre.

00:02:13 La chromatographie, le principe de base, le principe physico-chimique qui fait changer.

00:02:18 Tu vas voir dans les types de chromatographie, c'est juste le support qui va différencier avec de légères différences.

00:02:27 Ensuite, il y a l'électroforesse.

00:02:29 L'électroforesse, tu dois savoir le principe de l'électroforesse, c'est-à-dire l'hydrogène qu'on a dans le terminal.

00:02:36 On l'a mis dans la deuxième unité de la protéine.

00:02:41 Tu dois bien te rappeler que c'est la deuxième unité de la protéine, parce que tu as mis l'électroforesse.

00:02:46 C'est l'hydrogène.

00:02:48 On va voir ça, je veux juste te rappeler les notions de l'hydrogène.

00:02:52 Donc, je vais te faire comprendre la chromatographie de manière générale.

00:02:58 Alors, la chromatographie, c'est quoi ?

00:03:02 C'est un procédé physico-chimique qui va permettre quoi ?

00:03:06 Qui va permettre de faire des éléments chimiques.

00:03:10 Je vais te parler de comment on fait ça.

00:03:12 Dans la chromatographie, il y a deux éléments qui sont indispensables.

00:03:18 Deux éléments, on a des phases. Et dans ces phases, il y a la phase stationnaire et la phase mobile.

00:03:28 Ils sont indispensables dans la chromatographie.

00:03:32 Quelle est la chromatographie ?

00:03:34 Tu vas voir, je vais te dire quelle est la phase stationnaire et quelle est la phase mobile.

00:03:39 Tu vas me dire, c'est quoi la phase stationnaire et la phase mobile.

00:03:43 Alors, la phase stationnaire, c'est quoi ?

00:03:46 Tu dois savoir quel est le procédé de chromatographie, comment on va réussir à séparer, à identifier, à séparer nos éléments chimiques.

00:03:56 En l'occurrence, on a nos acides aminés.

00:03:58 Comment ?

00:03:59 En fait, c'est très simple.

00:04:00 On va mettre nos échantillons, les échantillons qui sont les aïénades que nous voulons étudier.

00:04:06 On les met sur une phase stationnaire.

00:04:11 Donc, ça dépend. Soit on les met directement dans la phase stationnaire.

00:04:14 C'est quoi la phase stationnaire ? C'est un support qui reste fixe.

00:04:18 Un support qui reste fixe.

00:04:20 Un support qui reste stationnaire, c'est-à-dire qui reste fixe.

00:04:23 Soit on le met directement dans le support, soit je vais injecter, on va voir ça en bas de la chromatographie sur colonne,

00:04:30 soit je vais directement injecter les échantillons aïés pour les poser sur la phase stationnaire qui est, comme je te dis, un support qui reste fixe. Il ne bouge pas.

00:04:41 Alors, c'est quoi l'intérêt de mettre mes échantillons sur ma phase stationnaire ?

00:04:46 L'intérêt, c'est qu'on va trouver la phase mobile.

00:04:50 La phase mobile, c'est quoi ?

00:04:53 C'est généralement un solvant ou un gaz.

00:04:56 Ça dépend de la chromatographie.

00:04:58 Mais en tout cas, c'est quoi ?

00:05:00 C'est une matière qui va bouger.

00:05:02 Là, elle va se déplacer.

00:05:04 Elle va se déplacer sur quoi ?

00:05:05 Elle va se déplacer, elle va traverser la phase stationnaire.

00:05:08 Tu vois à peu près le procédé.

00:05:10 Je vais te dire ce que je veux dire.

00:05:12 Si je veux te dire le procédé, qui met les échantillons dans la phase stationnaire ?

00:05:18 J'aurai ma phase mobile qui va faire quoi ?

00:05:20 Ici, en l'occurrence, sur papier ou sur couche-main, c'est quoi ?

00:05:23 C'est un solvant.

00:05:25 Je vais te dire ce que je veux dire.

00:05:26 C'est ce solvant, c'est la phase mobile.

00:05:28 Et c'est quoi ?

00:05:29 Elle va se déplacer, elle va migrer.

00:05:32 Elle va migrer tout au long de quoi ?

00:05:34 De la phase stationnaire.

00:05:36 D'accord ?

00:05:37 Cette migration, elle va entraîner quoi, à ton avis ?

00:05:42 Maintenant, je vais te donner les échantillons.

00:05:44 Cette migration va entraîner une migration, un déplacement,

00:05:50 par exemple, des échantillons que j'ai envie d'identifier et de séparer.

00:05:54 Et du coup, je me demande,

00:05:57 cette migration,

00:05:59 ce déplacement de mes échantillons,

00:06:01 grâce à quoi ?

00:06:03 Grâce au déplacement de ma phase mobile sur ma phase stationnaire.

00:06:07 Est-ce que les échantillons,

00:06:09 si on les sépare,

00:06:10 ils ont la même distance de migration ?

00:06:12 Ils ont la même distance de migration.

00:06:15 Bien sûr que non.

00:06:16 Un élément chimique,

00:06:18 si on le sépare d'un autre élément chimique,

00:06:21 il aura quoi ?

00:06:22 Une distance de migration qui sera différente.

00:06:25 Eh oui, c'est le but de la chromatographie.

00:06:28 Donc, la chromatographie va permettre de séparer quoi ?

00:06:31 D'identifier et de séparer,

00:06:33 de séparer les éléments chimiques.

00:06:36 Nous, on sait ce qu'ils sont.

00:06:37 Ils sont les aménions.

00:06:39 Bien sûr que non.

00:06:40 Grâce à quoi ?

00:06:41 Grâce à la comparaison entre leurs distances de migration.

00:06:44 Oui, mais comment ça se fait, la migration ?

00:06:46 La migration, bien sûr,

00:06:48 grâce au déplacement, à la migration de la phase mobile

00:06:52 sur une phase stationnaire.

00:06:54 D'accord ?

00:06:55 C'est ce qui est le principe de chromatographie.

00:06:59 Il faut comprendre le principe

00:07:01 de quelle chromatographie il est plus facile.

00:07:04 D'accord ?

00:07:05 Bon.

00:07:06 On va commencer avec le premier type de chromatographie,

00:07:09 la chromatographie sur papier.

00:07:11 Pour cela, je ne vais pas

00:07:12 je ne vais pas utiliser la classification de ce diapo.

00:07:17 Je vais vous montrer les chromatographies,

00:07:20 les méthodes chromatographiques.

00:07:22 Et puis, je vais vous parler des méthodes de l'hygroforesse.

00:07:24 D'accord ?

00:07:25 Donc, pour ma chromatographie sur papier,

00:07:29 je vais vous parler de la chromatographie.

00:07:31 Vous vous demandez, c'est quoi ?

00:07:32 C'est un procédé qui va nous permettre de séparer,

00:07:34 de séparer les aménions entre eux.

00:07:38 Je vais séparer les aménions grâce à quoi ?

00:07:40 Grâce à leur distance de migration.

00:07:43 La différence entre leur distance de migration

00:07:45 et la distance de la migration entre eux,

00:07:47 va permettre de les identifier, de les séparer.

00:07:50 Alors, comme je vous ai dit,

00:07:51 cette migration se fait grâce à quoi ?

00:07:52 Grâce à une phase stationnaire,

00:07:54 une phase fixe,

00:07:55 et grâce à une phase mobile,

00:07:57 qui va permettre à la migration

00:07:59 qui va se déplacer,

00:08:00 qui va migrer.

00:08:01 C'est pour cela qu'on l'appelle la mobile.

00:08:04 En l'occurrence, sur papier,

00:08:05 ce sont les phases stationnaires

00:08:06 ou les phases mobiles.

00:08:08 La phase stationnaire, c'est quoi ?

00:08:11 C'est l'eau,

00:08:12 c'est l'eau,

00:08:13 c'est l'eau qui est dans le support,

00:08:17 qui est le papier de Wattman.

00:08:19 Vous avez vu ça dans le lycée ?

00:08:22 Qui a lu la chromatographie ?

00:08:23 Qui a lu cette chromatographie sur papier ?

00:08:25 Ils vous disent qu'on prend une feuille de papier de Wattman,

00:08:29 qu'on l'étale avec la main,

00:08:31 qu'on la met dans un solvant,

00:08:32 et que le solvant va sortir de la feuille de papier de Wattman,

00:08:35 et donc, ça va donner une migration.

00:08:36 Cette migration,

00:08:38 cette migration par capillarité,

00:08:40 c'est ce que je vous ai dit.

00:08:41 Cette migration par solvant,

00:08:42 elle va entraîner quoi ?

00:08:43 Elle va entraîner la migration des échantillons.

00:08:46 En l'occurrence, c'est les acides aminés.

00:08:49 Donc, je t'ai dit que la phase stationnaire, c'est l'eau,

00:08:54 l'eau qui est dans la feuille de papier de Wattman.

00:08:57 Ici, si vous vous en souciez,

00:08:59 vous allez trouver une variante de ce diapo,

00:09:02 où dans ce schéma,

00:09:03 ils ont dessiné l'eau.

00:09:07 C'est-à-dire que la feuille de Wattman,

00:09:08 ils l'ont mis avant de la trouver dans le solvant.

00:09:11 Donc, ne confondez pas dans ce schéma.

00:09:13 Ce qui est en bleu clair, c'est l'eau.

00:09:15 C'est l'eau qui est contenue dans la feuille de papier de Wattman.

00:09:17 Et ce qui est en foncé,

00:09:19 ce sont les deux bleus foncés,

00:09:21 c'est quoi ?

00:09:22 C'est le solvant qui est là,

00:09:23 qui est la phase mobile.

00:09:25 Donc, la phase mobile, c'est quoi ?

00:09:27 C'est un éluant.

00:09:28 C'est un solvant aqueux organique.

00:09:31 D'accord ?

00:09:32 Et du coup, le principe de la chromatographie sur papier est simple.

00:09:36 On prend une feuille de papier de Wattman,

00:09:37 on fait un échantillon,

00:09:39 on le met, on le tire,

00:09:41 on le remet à l'eau,

00:09:43 on le remet à l'eau,

00:09:44 dans le solvant organique,

00:09:47 qui est la phase mobile.

00:09:48 Si vous voulez, vous pouvez prendre du papier absorbant,

00:09:50 du papier essuie,

00:09:51 ou vous le mettez dans le chenot,

00:09:53 mais si vous ne l'avez pas,

00:09:54 ce n'est pas le cas.

00:09:55 L'eau va sortir du papier.

00:09:56 Et du coup, ce n'est pas le cas.

00:09:57 L'eau va sortir du papier.

00:09:59 Donc, ici, c'est la même chose.

00:10:00 Le solvant va sortir du papier de Wattman.

00:10:02 Et c'est ça, la migration.

00:10:04 Donc, ça, c'est le principe de la chromatographie sur papier.

00:10:08 Alors, je vais vous dire ici,

00:10:09 comment on va pouvoir différencier les acides aminés,

00:10:12 comment on va voir comment la migration des acides aminés va pouvoir les différencier.

00:10:16 Je vais vous le montrer.

00:10:17 La migration, c'est une migration par capillarité.

00:10:21 C'est-à-dire,

00:10:22 on va le voir ici,

00:10:23 les acides aminés hydrophobes,

00:10:26 je vous l'ai dit,

00:10:27 ils vont migrer plus.

00:10:29 Alors que ceux qui sont hydrophiles,

00:10:31 ils vont migrer moins.

00:10:32 Vous allez dire, "mais pourquoi ?"

00:10:33 Je vais vous dire pourquoi.

00:10:34 On a dit que la face stationnaire de ces acides aminés,

00:10:37 je vous le répète,

00:10:38 la face stationnaire de ces acides aminés, c'est l'eau.

00:10:40 C'est l'eau du papier de Wattman.

00:10:43 Si un acide aminé ou un élément chimique est hydrophile,

00:10:47 il aime l'eau.

00:10:48 Ça veut dire quoi ?

00:10:49 Il est hydrophile, il aime l'eau.

00:10:51 Donc, il aime l'eau qui est la face stationnaire.

00:10:54 Il aime la face stationnaire.

00:10:56 Est-ce qu'il va migrer ?

00:10:57 Est-ce qu'il va bouger ?

00:10:58 Il ne va pas bouger.

00:10:59 Pourquoi ?

00:11:00 Parce qu'il a du plaisir dans la face stationnaire

00:11:03 parce qu'il est hydrophile.

00:11:05 D'accord ?

00:11:06 À l'inverse, un acide aminé qui est,

00:11:08 ou un élément chimique de manière générale,

00:11:10 pour ma chromatographie,

00:11:11 il est hydrophobe.

00:11:13 Il est hydrophobe, mais il n'aime pas l'eau.

00:11:15 Il est peu soluble dans l'eau.

00:11:17 Ça veut dire quoi ?

00:11:18 Ça veut dire qu'il a du plaisir dans le solvant.

00:11:21 Il a du plaisir dans la face mobile.

00:11:25 Vous comprenez ?

00:11:26 Il est plus soluble dans la face mobile

00:11:28 que dans la face stationnaire.

00:11:31 Donc, il ne va pas aimer l'eau,

00:11:33 mais il aime la face stationnaire.

00:11:34 Il va aimer la face mobile.

00:11:35 Il ne va pas bouger.

00:11:36 Il va migrer plus.

00:11:37 Il va migrer plus.

00:11:38 C'est pour ça que les acides aminés qui sont hydrophobes,

00:11:41 ce sont ceux qui vont migrer le plus.

00:11:43 Alors que ceux qui sont hydrophiles,

00:11:45 ils aiment l'eau.

00:11:46 L'eau est la face stationnaire.

00:11:47 Ils restent dans leur lieu.

00:11:48 Ils se sentent bien.

00:11:50 D'accord ?

00:11:51 Alors, il y a un détail aussi.

00:11:55 C'est que la chromatographie,

00:11:57 je ne sais pas si vous voyez,

00:11:58 ça c'est un détail,

00:11:59 ça permet de chromatographier les gens

00:12:01 parce qu'on utilise des colorants ici.

00:12:03 On utilise une coloration

00:12:04 pour que les gens soient entourés.

00:12:06 Donc, il y a une propriété.

00:12:08 Comment on voit le truc qui a une propriété

00:12:11 avec les couleurs des acides aminés ?

00:12:13 C'est la nitrogène.

00:12:14 C'est pour ça que la chromatographie sur papier

00:12:17 donne la coloration avec la nitrogène.

00:12:20 D'accord ?

00:12:21 Alors, pour comparer,

00:12:23 pour comparer leur distance,

00:12:25 on a deux, deux quoi ?

00:12:27 Deux valeurs.

00:12:29 Deux valeurs mathématiques.

00:12:30 Deux rapports mathématiques.

00:12:32 Est-ce que nous pouvons comparer,

00:12:34 nous pouvons comparer,

00:12:35 je vais vous montrer le schéma en dessous,

00:12:36 est-ce que nous pouvons comparer

00:12:37 la distance de migration des acides aminés ?

00:12:39 Je vais vous montrer bien le schéma.

00:12:41 Est-ce que nous pouvons comparer

00:12:42 la distance de migration des acides aminés

00:12:45 avec quoi ?

00:12:46 Avec la distance de l'hégéra

00:12:48 de la solvente,

00:12:49 de la phase mobile.

00:12:50 On peut ?

00:12:51 Donc, là, je fais petit H sur grand H.

00:12:53 Ce rapport-là,

00:12:55 comment je l'ai dit ?

00:12:56 Ça, c'est le rapport qui fèche,

00:12:58 le rapport au front.

00:13:00 C'est le RF.

00:13:02 Ce RF, les gens, il est très important

00:13:04 parce que c'est lui qui est le plus utilisé,

00:13:05 c'est le rapport qui est le plus utilisé.

00:13:07 Pourquoi ?

00:13:08 Pour identifier mon acide aminé

00:13:11 ou là, mon élément chimique.

00:13:12 C'est-à-dire qu'il faut savoir

00:13:13 que chaque acide aminé a son RF,

00:13:15 a une distance de migration,

00:13:17 a une distance de l'hégéra.

00:13:19 Ce rapport au front, c'est quoi ?

00:13:21 C'est la distance de l'acide aminé

00:13:23 au front,

00:13:24 la division au front,

00:13:25 la distance de l'hégéra

00:13:27 de mon solvente.

00:13:28 D'accord ?

00:13:29 Quand mon acide aminé est soluble

00:13:32 dans le solvente,

00:13:33 je dis bien soluble au front,

00:13:35 dans le solvente,

00:13:36 dans la phase mobile,

00:13:37 quand son RF va sortir,

00:13:39 il va aller vers 1

00:13:42 vu que c'est ce rapport mathématique.

00:13:45 C'est la division,

00:13:46 c'est du coup, le rapport.

00:13:48 Donc, le maximum de l'acide aminé,

00:13:50 c'est le 1.

00:13:51 Et le minimum, c'est le 0.

00:13:53 Donc, on est entre 0 et 1 déjà.

00:13:55 Donc, si le soluté est là,

00:13:57 l'acide aminé,

00:13:58 ou l'élément chimique,

00:14:00 c'est la chromatographie.

00:14:01 Si le soluté est là,

00:14:03 il est soluble dans la phase mobile,

00:14:05 en l'occurrence,

00:14:06 ici, c'est mon solvente organique,

00:14:09 c'est ça ?

00:14:10 Son RF va être en haut

00:14:12 et il va être à 1.

00:14:14 A l'inverse,

00:14:15 si mon acide aminé est soluble,

00:14:18 c'est mon solvente organique,

00:14:20 soluble dans le mois,

00:14:22 dans la phase stationnaire.

00:14:24 Ce n'est pas ça.

00:14:25 La migration thermique n'est pas là.

00:14:27 Donc, son RF est consoluble.

00:14:30 C'est logique.

00:14:32 D'accord ?

00:14:33 Il y a une autre valeur,

00:14:34 on va dire qu'il y a deux rapports.

00:14:36 Le deuxième rapport,

00:14:37 il n'est pas là,

00:14:38 mais il faut le savoir,

00:14:40 c'est le RT,

00:14:41 c'est le rapport intime.

00:14:42 Je t'ai dit qu'on peut comparer,

00:14:44 on peut comparer,

00:14:45 on peut faire la distance de migration

00:14:47 therme d'acide aminé

00:14:48 avec la distance de migration

00:14:50 thermo-solvente.

00:14:52 Je peux comparer

00:14:54 la distance de migration

00:14:56 thermo-acide aminé

00:14:57 avec la distance de migration

00:14:58 therme d'un autre acide aminé

00:15:00 ou therme d'un autre témoin,

00:15:01 therme d'un autre élément chimique.

00:15:03 D'accord ?

00:15:04 C'est ça le rapport au témoin.

00:15:06 Donc, tu vas me dire,

00:15:07 oui, c'est un RT,

00:15:08 vu que tu peux comparer

00:15:09 avec un témoin.

00:15:10 Et le témoin, ça peut être

00:15:11 un autre acide aminé

00:15:13 ou un autre élément chimique

00:15:14 ou autre.

00:15:15 Donc, il y a plusieurs RT,

00:15:16 donc ça va dépendre

00:15:17 de l'acide aminé.

00:15:18 Donc le RT,

00:15:19 tu as avec l'acide aminé

00:15:20 et le témoin que tu vas utiliser.

00:15:22 C'est pour ça qu'on n'utilise pas

00:15:23 beaucoup le RT,

00:15:24 parce qu'il y en a beaucoup

00:15:25 et du coup, ça dépend

00:15:26 de l'acide que tu as dans le labo.

00:15:28 D'accord ?

00:15:29 On utilise beaucoup plus le RF.

00:15:31 D'accord ?

00:15:32 Donc, c'était tout

00:15:33 pour la chromatographie sur papier.

00:15:35 Regarde,

00:15:36 sur couche mince,

00:15:37 on ne va pas en mettre beaucoup.

00:15:38 Sur couche mince,

00:15:39 on ne va pas en mettre beaucoup

00:15:40 parce que c'est la même chose,

00:15:42 il n'y a qu'une seule différence.

00:15:44 Regarde,

00:15:45 le support,

00:15:46 le support est ici,

00:15:48 mais je ne sais pas pourquoi.

00:15:49 Le support est ici,

00:15:50 mais je ne sais pourquoi.

00:15:51 Mon papier de Wattman,

00:15:53 j'aurai quoi ?

00:15:54 J'aurai une plaque chromatographique.

00:15:58 Regarde la plaque chromatographique,

00:15:59 les gens,

00:16:00 c'est une plaque,

00:16:01 celle-ci,

00:16:02 c'est une plaque,

00:16:03 celle-ci,

00:16:04 elle est composée

00:16:05 de verre ou d'aluminium.

00:16:07 Ça dépend.

00:16:08 Généralement,

00:16:09 on aime utiliser le verre,

00:16:10 mais on peut utiliser l'aluminium.

00:16:11 Donc, c'est une plaque chromatographique.

00:16:13 Est-ce que c'est une plaque

00:16:14 qui est à l'intérieur

00:16:15 de la face stationnaire ?

00:16:16 Non.

00:16:17 La plaque, c'est un support.

00:16:18 La face stationnaire,

00:16:19 c'est quoi ?

00:16:20 Ce sera un gel

00:16:21 qu'on va tapisser

00:16:22 tout au long de la plaque.

00:16:23 On appelle ça

00:16:24 le gel de silice.

00:16:27 On appelle ça

00:16:28 le gel de silice.

00:16:29 Donc,

00:16:30 ma face stationnaire,

00:16:31 ce sera quoi ?

00:16:32 Ce sera le gel de silice

00:16:34 que les gens

00:16:35 font sur cette plaque chromatographique,

00:16:38 sur cette plaque chromatographique

00:16:39 qui est faite de verre.

00:16:40 Donc,

00:16:41 il faut qu'il y ait de la plaque chromatographique

00:16:43 qui est faite de verre

00:16:44 ou d'aluminium,

00:16:45 ça dépend.

00:16:46 D'accord ?

00:16:47 Voilà.

00:16:48 Le reste,

00:16:49 c'est la même chose.

00:16:50 La chromatographie sur couche mince,

00:16:51 je vais vous expliquer

00:16:52 ce que je veux vous dire

00:16:53 sur papier.

00:16:54 Comment ?

00:16:55 C'est quelque chose ou c'est autre chose ?

00:16:56 Déjà,

00:16:57 j'ai le même principe

00:16:58 qu'est la chromatographie.

00:16:59 Donc,

00:17:00 avoir une face stationnaire,

00:17:01 avoir une face mobile,

00:17:02 je mets mes échantillons,

00:17:03 nous sommes en migration,

00:17:05 la migration par capillarité,

00:17:07 c'est ça ?

00:17:08 C'est un morceau de vent

00:17:09 qui va entraîner la migration

00:17:10 de mes échantillons.

00:17:11 Cette distance de migration

00:17:12 de mes acides aminés,

00:17:13 de mes éléments chimiques,

00:17:14 de mes échantillons,

00:17:15 elle va me permettre

00:17:16 de comparer,

00:17:17 de comparer entre eux,

00:17:18 et du coup,

00:17:19 de comparer entre eux,

00:17:20 soit avec un T-

00:17:21 soit avec un R-

00:17:22 avec la distance de migration

00:17:23 de la face mobile.

00:17:24 Et du coup,

00:17:25 je vais pouvoir identifier

00:17:26 et différencier

00:17:27 les aminés

00:17:28 pour les voir

00:17:29 dans les échantillons

00:17:30 de la même face stationnaire.

00:17:31 C'est le même principe.

00:17:32 Donc,

00:17:33 je vais pouvoir

00:17:34 identifier

00:17:35 et différencier

00:17:36 les aminés

00:17:37 de la même face stationnaire

00:17:38 et de la même face mobile.

00:17:39 C'est le même principe.

00:17:40 La seule différence,

00:17:41 les gens,

00:17:42 la seule différence,

00:17:43 c'est le support.

00:17:44 Au lieu d'avoir

00:17:45 un papier,

00:17:46 le papier de Wattman,

00:17:47 ou la face stationnaire

00:17:48 qui est le mâle

00:17:49 qui est le papier.

00:17:50 Là,

00:17:51 j'ai une plaque,

00:17:52 une plaque en quoi ?

00:17:53 Une plaque en verre

00:17:54 ou en aluminium

00:17:55 qui est assez mince

00:17:56 et du coup,

00:17:57 je vais mettre

00:17:58 du gel de silice pour ça.

00:17:59 Et ce sera

00:18:00 le gel de silice

00:18:01 pour ma face stationnaire.

00:18:02 Bon,

00:18:03 on va voir comment

00:18:04 on fait

00:18:05 sur une couche mince.

00:18:06 Elle est

00:18:07 moins archaïque

00:18:08 que celle sur papier.

00:18:09 Elle donne

00:18:10 de meilleurs résultats.

00:18:11 Mais ce n'est pas

00:18:12 le top du top.

00:18:13 Le top du top,

00:18:14 on va voir,

00:18:15 c'est le "chirga".

00:18:16 OK ?

00:18:17 C'était

00:18:18 les deux chromatographies.

00:18:19 Donc ici,

00:18:20 on va voir un petit exemple.

00:18:21 Cet exemple,

00:18:22 je ne comprends pas

00:18:23 ce qu'il y a.

00:18:24 Parce que quelqu'un

00:18:25 qui a fait ça,

00:18:26 je ne comprends pas.

00:18:27 Donc,

00:18:28 imaginez

00:18:29 que vous trouviez

00:18:30 Wassim

00:18:31 qui en tant que médecin

00:18:32 ne s'entend pas.

00:18:33 Imaginez que je fais

00:18:34 spécialité biochimiste

00:18:35 ou là,

00:18:36 je m'en fous,

00:18:37 on dirait un truc

00:18:38 dans le labo.

00:18:39 Voilà, dans le labo.

00:18:40 Et ils vous disent,

00:18:41 vous ne le savez pas,

00:18:42 ils vous disent en tant que médecin

00:18:43 qui est dans le labo,

00:18:44 ils vous donnent

00:18:45 un échantillon.

00:18:46 Un échantillon

00:18:47 qui est

00:18:48 de la maladie.

00:18:49 De la maladie.

00:18:50 Imaginons

00:18:51 que c'est un échantillon

00:18:52 de l'urine.

00:18:53 Un échantillon d'urine

00:18:54 de la maladie.

00:18:55 Vous savez ce que

00:18:56 vous allez faire ?

00:18:57 J'ai envie de savoir,

00:18:58 en tant que médecin,

00:18:59 j'ai envie de savoir

00:19:00 les acides aminés

00:19:01 qui sont

00:19:02 dans l'urine

00:19:03 de la maladie.

00:19:04 D'accord ?

00:19:06 Le fait de savoir

00:19:07 les acides aminés

00:19:08 qui sont dans l'urine

00:19:09 de la maladie,

00:19:10 ça va me permettre

00:19:11 de quoi ?

00:19:12 De diagnostiquer

00:19:13 une maladie.

00:19:14 Par exemple,

00:19:15 si j'ai des acides aminés

00:19:16 plus fort que normal.

00:19:17 Donc,

00:19:18 on a aussi une dernière.

00:19:19 Si je veux faire

00:19:20 ma chromatographie

00:19:21 par exemple sur papier,

00:19:22 dans le labo,

00:19:23 je n'ai pas les moyens

00:19:24 de faire une chromatographie

00:19:25 sur papier

00:19:26 ou sur papier.

00:19:27 C'est important.

00:19:28 Qu'est-ce que je vais faire ?

00:19:29 Je vais utiliser

00:19:30 des étalons

00:19:31 et

00:19:32 dans mon exemple,

00:19:34 ce que je vais utiliser,

00:19:35 un échantillon

00:19:36 qui est un mec malade.

00:19:37 Je peux utiliser

00:19:38 un échantillon

00:19:39 qui est un témoin.

00:19:40 Alors,

00:19:41 c'est quoi un étalon ?

00:19:42 C'est quoi un témoin ?

00:19:43 C'est quoi malade ?

00:19:44 Le malade,

00:19:45 c'est l'échantillon

00:19:46 que je veux faire.

00:19:47 L'échantillon

00:19:48 à étudier.

00:19:49 L'échantillon

00:19:50 qui est la maladie.

00:19:51 L'exemple est celui-ci.

00:19:52 Dans le labo,

00:19:53 on a le témoin

00:19:54 qui est l'urine

00:19:55 d'une personne malade.

00:19:56 On suspecte

00:19:57 quelque chose

00:19:58 dans l'urine

00:19:59 mais on considère

00:20:00 qu'elle est malade.

00:20:01 On considère

00:20:02 qu'elle est malade.

00:20:03 D'accord.

00:20:04 Je vais ramener

00:20:05 première dessus,

00:20:06 je vais ramener

00:20:07 des étalons.

00:20:08 C'est quoi les étalons ?

00:20:09 Ce sont,

00:20:10 dans mon cas,

00:20:11 des acides aminés.

00:20:12 On les connait.

00:20:13 Ce sont des acides.

00:20:14 Ce sont des acides aminés

00:20:15 que je connais.

00:20:16 On les connait

00:20:17 à distance

00:20:18 de chromatographie.

00:20:19 On les connait

00:20:20 par exemple

00:20:21 avec le rose.

00:20:22 Je ne sais pas

00:20:23 ce rouge.

00:20:24 C'est de l'alaline.

00:20:25 Ce rouge,

00:20:26 je ne sais pas,

00:20:27 c'est de l'acide aspartic.

00:20:28 Ce bleu,

00:20:29 c'est de l'alizine.

00:20:30 Donc,

00:20:31 mes étalons,

00:20:32 ce sont quoi ?

00:20:33 Ce sont des acides aminés

00:20:34 ou des éléments chimiques

00:20:35 que nous connaissons.

00:20:36 Je les connais.

00:20:37 Je vais les utiliser

00:20:38 pour comparer

00:20:39 les éléments

00:20:40 qui sont dans

00:20:41 l'échantillon malade.

00:20:42 Vous allez dire

00:20:43 "Ok, oui c'est ça.

00:20:44 Donc, je vais étudier

00:20:45 cet échantillon malade

00:20:46 avec ces étalons

00:20:47 et je vais comparer.

00:20:48 Qu'est-ce que c'est

00:20:49 qu'un témoin dans l'espace ?

00:20:50 Qu'est-ce que c'est qu'un dérobé ?

00:20:51 Le témoin,

00:20:52 c'est aussi un échantillon.

00:20:53 C'est aussi un échantillon.

00:20:54 Mais,

00:20:55 on ne va pas l'étudier

00:20:56 "au début".

00:20:57 Au début,

00:20:58 on va l'utiliser

00:20:59 pour comparer

00:21:00 les éléments

00:21:01 malades.

00:21:02 Dans l'exemple,

00:21:03 je vais vous montrer.

00:21:04 Je vais vous mettre dans le labo.

00:21:05 Ils vous disent

00:21:06 "un échantillon d'urine

00:21:07 de

00:21:08 un malade".

00:21:09 Tu te dis

00:21:10 "Ok, je vais étudier

00:21:11 cet échantillon

00:21:12 pour voir

00:21:13 les acides aminés

00:21:14 qui sont dedans.

00:21:15 Je vais prendre

00:21:16 mes étalons

00:21:17 qui sont des acides aminés

00:21:18 qui sont normalement

00:21:19 dans l'urine.

00:21:20 Ils sont dans l'urine.

00:21:21 Pour comparer,

00:21:22 je vais utiliser

00:21:23 un échantillon d'urine

00:21:24 pour comparer

00:21:25 cet étalon malade

00:21:26 avec

00:21:27 cet échantillon d'urine

00:21:28 d'un malade

00:21:29 qui n'est pas malade

00:21:30 mais qui est en santé.

00:21:31 On va lui donner

00:21:32 le témoin.

00:21:33 Et du coup,

00:21:34 cet échantillon malade,

00:21:35 je vais le comparer

00:21:36 avec le témoin

00:21:37 avec mes étalons.

00:21:38 Je vais le comparer

00:21:39 avec le témoin

00:21:40 avec mes étalons.

00:21:41 Ça va donner ça.

00:21:42 Regardez.

00:21:43 Donc,

00:21:44 on a mis le malade

00:21:45 à droite.

00:21:46 On a mis le témoin

00:21:47 ici,

00:21:48 dans le labo

00:21:49 et les étalons

00:21:50 aussi.

00:21:51 Les étalons sont

00:21:52 des éléments chimiques

00:21:53 ou des acides aminés

00:21:54 ici

00:21:55 et là,

00:21:56 on sait

00:21:57 la distance

00:21:58 de l'hécarter.

00:21:59 Je sais que l'étalon 1

00:22:00 est ici.

00:22:01 On sait ce que c'est.

00:22:02 L'étalon 2,

00:22:03 on sait ce que c'est.

00:22:04 L'étalon 3,

00:22:05 on sait ce que c'est.

00:22:06 Les deux échantillons

00:22:07 qui sont malades

00:22:08 ou témoins,

00:22:09 si on sait

00:22:10 qu'il y a un bois

00:22:11 dans la même distance,

00:22:12 dans la même ligne

00:22:13 d'un étalon,

00:22:14 je sais que,

00:22:15 du coup,

00:22:16 ce bois,

00:22:17 ça veut dire

00:22:18 que c'est l'acide aminé

00:22:19 que j'ai.

00:22:20 Si l'étalon 2

00:22:21 était quoi ?

00:22:22 C'était l'acide aspartic.

00:22:23 Mais dans ce bois,

00:22:24 si j'étais un témoin

00:22:25 et que j'étais malade,

00:22:26 je serais dans l'acide aspartic

00:22:27 dans cet échantillon.

00:22:28 D'accord ?

00:22:29 Ici,

00:22:30 on a le point

00:22:31 de l'étalon 3

00:22:32 qui est le bois

00:22:33 que j'ai dit

00:22:34 que j'ai mis au bois.

00:22:35 Et là,

00:22:36 ça veut dire

00:22:37 que mon malade

00:22:38 et mon témoin,

00:22:39 les deux échantillons

00:22:40 que je leur ai appris,

00:22:41 ont un bois.

00:22:42 Comment ?

00:22:43 Ici,

00:22:44 l'étalon 1,

00:22:45 l'étalon 1,

00:22:46 c'est plutôt

00:22:47 que j'étais malade.

00:22:48 Ah !

00:22:49 Ici,

00:22:50 c'est intéressant.

00:22:51 Comme je te l'ai dit,

00:22:52 le témoin

00:22:53 est un témoin

00:22:54 qui est plus malade

00:22:55 que le témoin

00:22:56 qui est plus malade.

00:22:57 Donc,

00:22:58 c'est un témoin

00:22:59 qui est plus malade

00:23:00 que le témoin

00:23:01 qui est plus malade.

00:23:02 Donc,

00:23:03 c'est un témoin

00:23:04 qui est plus malade

00:23:05 que le témoin

00:23:06 qui est plus malade.

00:23:07 Donc,

00:23:08 c'est un témoin

00:23:09 qui est plus malade

00:23:10 que le témoin

00:23:11 qui est plus malade.

00:23:12 Donc,

00:23:13 c'est un témoin

00:23:14 qui est plus malade

00:23:15 que le témoin

00:23:16 qui est plus malade.

00:23:17 Donc,

00:23:18 c'est un témoin

00:23:19 qui est plus malade

00:23:20 que le témoin

00:23:21 qui est plus malade.

00:23:22 Donc,

00:23:23 voilà.

00:23:24 Donc,

00:23:25 généralement,

00:23:26 dans la chromatographie,

00:23:27 je vais utiliser

00:23:28 l'échantillon

00:23:29 qui a été étudié.

00:23:30 Je vais prendre

00:23:31 un deuxième échantillon

00:23:32 que l'on va comparer

00:23:33 avec des étalons

00:23:34 qui sont des éléments chimiques,

00:23:35 des enceintes chimiques

00:23:36 ou des aminés.

00:23:37 Pour les connaître,

00:23:38 pour les comparer,

00:23:39 on compare.

00:23:40 Si on les met

00:23:41 dans la même zone,

00:23:42 dans la même distance

00:23:43 de migration,

00:23:44 on les connaît

00:23:45 et du coup,

00:23:46 c'est la même chose.

00:23:47 C'est le même

00:23:48 échantillon

00:23:49 que celui-ci.

00:23:50 Le même échantillon

00:23:51 que celui-ci.

00:23:52 Le même acide aminé

00:23:53 que celui-ci.

00:23:54 D'accord ?

00:23:55 C'est ce qu'on a.

00:23:56 Alors,

00:23:57 l'électrophorese

00:23:58 et l'électrofocalisation

00:23:59 on va en parler plus tard.

00:24:00 Je vais vous expliquer

00:24:01 les méthodes chromatographiques.

00:24:02 Donc,

00:24:03 ce que tu viens de faire,

00:24:04 c'est d'utiliser

00:24:05 deux chromatographies.

00:24:06 Une chromatographie

00:24:07 sur papier

00:24:08 et sur couche mince.

00:24:09 Tu as trois autres.

00:24:10 Ce sont

00:24:11 les chromatographies

00:24:12 face-gazeuse,

00:24:13 les chromatographies

00:24:14 échangeuse-dillon

00:24:15 et les chromatographies

00:24:16 qui s'appliquent

00:24:17 à haute pression.

00:24:18 Haute pression,

00:24:19 haute performance,

00:24:20 c'est-à-dire

00:24:21 l'HPLC

00:24:22 qui est la plus utilisée

00:24:23 et la meilleure d'ailleurs.

00:24:24 Peut-être le meilleur

00:24:25 entre les deux pour la fin.

00:24:26 Ces deux magasins

00:24:27 sont des chromatographies

00:24:28 sur colle.

00:24:29 Ce sont des chromatographies

00:24:30 sur colle.

00:24:31 Tu te dis,

00:24:32 "Oui, c'est..."

00:24:33 "Ça veut dire quoi

00:24:34 "chromatographie sur colle ?"

00:24:35 Tu connais

00:24:36 c'est quoi la chromatographie ?

00:24:37 Je te l'ai expliqué.

00:24:38 Le principe

00:24:39 de la chromatographie

00:24:40 c'est quoi ?

00:24:41 C'est du coup,

00:24:42 on va séparer

00:24:43 des éléments chimiques

00:24:44 grâce à quoi ?

00:24:45 Grâce à

00:24:46 la distance de la hiérarchie.

00:24:47 Donc,

00:24:48 la migration,

00:24:49 la migration,

00:24:50 comment elle se fait ?

00:24:51 Elle se fait avec

00:24:52 une phase mobile

00:24:53 qui va se déplacer

00:24:54 qui va entraîner

00:24:55 des échantillons

00:24:56 et ces échantillons

00:24:57 et cette phase mobile

00:24:58 vont se déplacer

00:24:59 sur la phase stationnaire

00:25:00 et la place fixe.

00:25:01 Ici,

00:25:02 la chromatographie

00:25:03 sur colonne,

00:25:04 de manière générale,

00:25:05 on va utiliser

00:25:06 une phase stationnaire

00:25:07 qui va être

00:25:08 une colonne.

00:25:09 Alors,

00:25:10 ce qui est

00:25:11 phase stationnaire,

00:25:12 c'est où je suis

00:25:13 au-delà de la colonne.

00:25:14 La colonne,

00:25:15 c'est un support.

00:25:16 La colonne,

00:25:17 c'est un support,

00:25:18 les gens.

00:25:19 Donc,

00:25:20 la phase stationnaire,

00:25:21 c'est où je suis

00:25:22 derrière la colonne.

00:25:23 La phase interne

00:25:24 à la colonne intérieure.

00:25:25 D'accord ?

00:25:26 Donc,

00:25:27 le même principe.

00:25:28 J'ai une phase mobile

00:25:29 qui est,

00:25:30 par exemple,

00:25:31 c'est un liquide,

00:25:32 un solvant,

00:25:33 un liquide organique.

00:25:34 Je vais faire quoi ?

00:25:35 Je vais le pomper

00:25:36 ou le baiter,

00:25:37 ou ne baiter pas,

00:25:38 le baiter à la phase stationnaire.

00:25:39 Donc,

00:25:40 ma phase mobile,

00:25:41 elle va se déplacer,

00:25:42 elle va se déplacer

00:25:43 tout au long

00:25:44 de ma phase stationnaire.

00:25:45 Donc,

00:25:46 je vais mettre

00:25:47 mon échantillon

00:25:48 dans la phase stationnaire

00:25:49 en même temps

00:25:50 que je vais baiter

00:25:51 ma phase mobile.

00:25:52 C'est ça le principe

00:25:53 de chromatographie.

00:25:54 Jusque là,

00:25:55 c'est normal.

00:25:56 Maintenant,

00:25:57 ce qui va différencier

00:25:58 ce que j'ai vu

00:25:59 de l'arrière,

00:26:00 c'est qu'il y a

00:26:01 des choses

00:26:02 que je ne vais pas voir,

00:26:03 je ne vais pas les voir

00:26:04 à distance.

00:26:05 Je ne vais pas les voir

00:26:06 à distance

00:26:07 parce que

00:26:08 je ne vais pas

00:26:09 les voir

00:26:10 à distance.

00:26:11 Donc,

00:26:12 je vais mettre

00:26:13 mon échantillon

00:26:14 dans la distance

00:26:15 de la migration

00:26:16 de mes échantillons

00:26:17 de mes acides aminés.

00:26:18 Et ce que je vais dire,

00:26:19 vu que c'est une colonne

00:26:20 qui est verticale,

00:26:21 elle va tomber,

00:26:22 elle va descendre,

00:26:23 elle va se déplacer

00:26:24 dans la phase stationnaire.

00:26:25 La différence,

00:26:26 c'est quoi ?

00:26:27 C'est qu'il y a ici,

00:26:28 on va diminuer le temps

00:26:29 avant de diminuer la distance.

00:26:30 Donc,

00:26:31 on va diminuer le temps.

00:26:32 On va diminuer

00:26:33 le temps

00:26:34 qu'il faut

00:26:35 pour chaque,

00:26:36 pour chaque échantillon,

00:26:37 pour chaque acide aminé

00:26:38 pour qu'il ne sorte

00:26:39 de la colonne.

00:26:40 Donc,

00:26:41 on va diminuer

00:26:42 le temps

00:26:43 avant de sortir

00:26:44 de la colonne.

00:26:45 Et du coup,

00:26:46 il y aura une différence

00:26:47 de temps

00:26:48 entre les acides aminés

00:26:49 et les échantillons.

00:26:50 Je regarde l'exemple.

00:26:51 Ce rouge,

00:26:52 il a pris 20 minutes

00:26:53 pour sortir.

00:26:54 Ce bleu,

00:26:55 cet échantillon bleu,

00:26:56 il a pris 30 minutes.

00:26:57 Ce bleu clair,

00:26:58 c'est un bleu clair.

00:26:59 C'est un bleu foncé,

00:27:00 c'est un bleu clair.

00:27:01 Il a pris

00:27:02 plus de 50 minutes

00:27:03 pour sortir.

00:27:04 Donc,

00:27:05 la différence

00:27:06 de temps

00:27:07 entre,

00:27:08 la différence de temps

00:27:09 de sortie

00:27:10 de mes échantillons

00:27:11 ou de mes acides aminés

00:27:12 va induire quoi ?

00:27:13 Ça va me dire du coup

00:27:14 que j'ai une différence

00:27:15 de composition.

00:27:16 Ce n'est pas

00:27:17 les mêmes composés chimiques.

00:27:18 Et voilà,

00:27:19 on a donné du coup,

00:27:20 c'est ça le principe

00:27:21 de chromatographie.

00:27:22 OK,

00:27:23 on a donné le principe

00:27:24 de chromatographie

00:27:25 sur une colonne.

00:27:26 Donc,

00:27:27 on va dire que c'est ça.

00:27:28 Donc,

00:27:29 on va dire que c'est ça.

00:27:30 C'est bien.

00:27:31 Donc,

00:27:32 on va retirer

00:27:33 les acides aminés.

00:27:34 Donc,

00:27:35 je vais pouvoir

00:27:36 les séparer

00:27:37 parce que du coup,

00:27:38 comme je l'ai dit,

00:27:39 les acides aminés,

00:27:40 à la chasse

00:27:41 de la solubilité

00:27:42 des acides aminés,

00:27:43 à la chasse

00:27:44 de l'affinité

00:27:45 des acides aminés

00:27:46 avec la phase mobile.

00:27:47 À la chasse

00:27:48 de l'affinité

00:27:49 et de la solubilité

00:27:50 des acides aminés

00:27:51 avec la phase mobile,

00:27:52 eh bien,

00:27:53 tout le monde

00:27:54 ne va pas

00:27:55 prendre le temps

00:27:56 de se séparer

00:27:57 de la phase stationnaire.

00:27:58 Il doit être

00:27:59 très très soluble.

00:28:00 Très très soluble

00:28:01 et quoi ?

00:28:02 Il doit être

00:28:03 très très soluble.

00:28:04 Pourquoi ?

00:28:05 Dans la

00:28:06 phase mobile.

00:28:07 Si il est plus soluble

00:28:08 et quoi ?

00:28:09 Si il est plus soluble

00:28:10 et quoi ?

00:28:11 Dans la phase mobile,

00:28:12 il va être

00:28:13 très très soluble.

00:28:14 Il va être très très soluble.

00:28:15 La solubilité

00:28:16 de la phase mobile

00:28:17 à la chasse de la colonne,

00:28:18 si elle est soluble

00:28:19 et qu'elle a une bonne

00:28:20 affinité avec la solubilité,

00:28:21 elle va être très très soluble.

00:28:22 Donc, le temps

00:28:23 de séparation

00:28:24 va être très court.

00:28:25 D'accord ?

00:28:26 Par contre,

00:28:27 celui de l'acide aminé

00:28:28 ou de l'échantillon

00:28:29 chimique,

00:28:30 il est moins soluble

00:28:31 avec la solubilité

00:28:32 de la phase mobile

00:28:33 et quoi ?

00:28:34 Il va être

00:28:35 plus soluble.

00:28:36 C'est logique.

00:28:37 Il va être plus soluble

00:28:38 et plus rapide.

00:28:39 Il va être plus rapide

00:28:40 pour sortir

00:28:41 de la colonne.

00:28:42 D'accord ?

00:28:43 Donc ici,

00:28:44 je peux te dire

00:28:45 que ce composé rouge,

00:28:46 c'est très soluble

00:28:47 avec la solubilité

00:28:48 que j'ai utilisé.

00:28:49 Par contre,

00:28:50 ce composé bleu,

00:28:51 clair,

00:28:52 vert,

00:28:53 je ne sais pas,

00:28:54 je ne connais pas

00:28:55 de la couleur,

00:28:56 je ne sais jamais

00:28:57 ce qui est important.

00:28:58 Ce composé,

00:28:59 c'est très peu soluble

00:29:00 parce qu'il prend

00:29:01 plus de 50 m,

00:29:02 mais il ne sort pas.

00:29:03 Il est très peu soluble

00:29:04 avec la solubilité.

00:29:05 D'accord ?

00:29:06 Donc,

00:29:07 on va dire

00:29:08 que c'est super.

00:29:09 On réussit du coup

00:29:10 à différencier

00:29:11 les acides aminés

00:29:12 entre eux,

00:29:13 les échantillons

00:29:14 théoriques

00:29:15 entre eux.

00:29:16 Super !

00:29:17 Quand ils se déplacent,

00:29:18 est-ce qu'on va les récupérer ?

00:29:19 Oui,

00:29:20 on va les récupérer.

00:29:21 Oui,

00:29:22 on va les récupérer

00:29:23 des aiglures.

00:29:24 Ok,

00:29:25 donc comment on sait

00:29:26 quel acide aminé,

00:29:27 quel échantillon,

00:29:28 quel composé

00:29:29 sort de la colonne ?

00:29:30 Comment on sait ?

00:29:31 Et maintenant,

00:29:32 on va utiliser

00:29:33 une autre propriété

00:29:34 des acides aminés.

00:29:35 Une propriété physique

00:29:37 qui est la propriété spectrale

00:29:39 des acides aminés.

00:29:40 Les acides aminés,

00:29:41 ils absorbent,

00:29:42 ils absorbent dans l'UV.

00:29:44 Ils absorbent dans l'UV.

00:29:46 Donc,

00:29:47 on va avoir un détecteur

00:29:49 qui est un spectrophotomètre

00:29:51 que l'on met

00:29:53 dans le terminus,

00:29:54 je ne sais pas si ça peut se dire,

00:29:56 mais dans le terminus,

00:29:57 dans la fin de la colonne.

00:29:58 A chaque fois qu'il sort

00:29:59 un acide aminé,

00:30:00 il va sortir

00:30:01 un spectrophotomètre

00:30:02 qui va sortir

00:30:03 et qui va enregistrer le temps.

00:30:05 Le temps qu'a pris

00:30:06 ce composé pour sortir.

00:30:08 Ensuite,

00:30:09 ce détecteur va le bombarder

00:30:11 dans l'UV.

00:30:12 Il va bombarder dans l'UV,

00:30:13 il va voir le taux d'absorbance,

00:30:15 il va calculer

00:30:16 le taux d'absorbance.

00:30:18 Et chaque acide aminé,

00:30:19 chaque élément chimique

00:30:20 a un taux d'absorbance.

00:30:21 Donc,

00:30:22 ce détecteur va donner un graphe

00:30:23 qui est un chromatographe.

00:30:25 Ce graphe,

00:30:26 il va calculer

00:30:27 le taux d'absorbance

00:30:28 de chaque acide aminé.

00:30:29 Et chaque acide aminé,

00:30:30 chaque élément chimique

00:30:31 a un taux d'absorbance.

00:30:32 Ce chromatographe,

00:30:34 il va faire quoi ?

00:30:36 Il va donner le temps

00:30:37 que l'acide aminé a pris

00:30:38 pour sortir

00:30:39 ce composé

00:30:40 et il va donner le taux d'absorbance.

00:30:41 Comme ça,

00:30:42 je vais pouvoir savoir

00:30:43 chaque élément chimique

00:30:44 qui est dans ce spectrophotomètre.

00:30:47 Et je vais pouvoir

00:30:48 connaître son taux d'absorbance.

00:30:50 D'accord ?

00:30:51 Le temps qu'il a pris

00:30:52 pour sortir

00:30:53 avec son taux d'absorbance,

00:30:54 ça va permettre d'identifier,

00:30:55 de connaître

00:30:56 les éléments chimiques

00:30:57 qui sont dans ce spectrophotomètre.

00:30:59 Les éléments chimiques,

00:31:00 en pluriel,

00:31:01 sont dans ce spectrophotomètre.

00:31:03 D'accord ?

00:31:04 Ensuite,

00:31:05 en plus de ça,

00:31:06 c'est une autre chose,

00:31:07 c'est de suivre les mémoires.

00:31:08 En plus de savoir,

00:31:09 de pouvoir se séparer

00:31:10 et d'identifier

00:31:11 les acides aminés

00:31:12 ou les éléments chimiques,

00:31:13 on doit savoir

00:31:14 le volume de ces éléments.

00:31:15 Quel est le volume

00:31:16 des éléments chimiques

00:31:17 dans ce spectrophotomètre ?

00:31:18 Est-ce qu'il y en a

00:31:19 beaucoup ou pas ?

00:31:20 L'élément A,

00:31:21 est-ce qu'il y a plus

00:31:22 d'éléments B

00:31:23 dans ce spectrophotomètre

00:31:24 ou l'inverse ?

00:31:25 Est-ce que l'élément B

00:31:26 a plus d'éléments A ?

00:31:27 Du coup,

00:31:28 je peux calculer

00:31:29 le volume

00:31:30 d'élucidation,

00:31:31 le volume

00:31:32 de ce composé.

00:31:33 Le composé chimique

00:31:34 d'acides aminés

00:31:35 est-il suffisant

00:31:36 pour les échantillons ?

00:31:37 Est-ce qu'il y en a pas ?

00:31:38 Ce chromatogramme,

00:31:39 les gens,

00:31:40 ce chromatogramme,

00:31:41 qui est-il bien ?

00:31:42 Ici, j'ai un volume.

00:31:43 Ici, ce sont des pics.

00:31:44 Ce sont des pics

00:31:45 de l'absorbance

00:31:46 de mes composés chimiques,

00:31:47 les pics d'absorbance.

00:31:48 Et tu remarques bien,

00:31:49 regarde ce pic,

00:31:50 compare ce pic

00:31:51 à celui de gauche

00:31:52 ou à celui de droite,

00:31:53 et tu vois

00:31:54 que c'est un pic

00:31:55 de l'absorbance

00:31:56 de mes composés chimiques.

00:31:57 Et tu vois

00:31:58 que c'est un pic

00:31:59 de gauche

00:32:00 ou un pic de droite.

00:32:01 Bon,

00:32:02 là, c'est une trottinette,

00:32:03 les gens.

00:32:04 Compare le pic de gauche

00:32:05 et le pic de droite.

00:32:06 Qu'est-ce que tu remarques ?

00:32:07 Ne te dis pas

00:32:08 que c'est un pic de droite

00:32:09 et un pic de gauche

00:32:10 parce que ça,

00:32:11 c'est le taux d'absorbance.

00:32:12 C'est normal,

00:32:13 vu que les composés

00:32:14 sont différents,

00:32:15 ils n'ont pas

00:32:16 le même taux d'absorbance.

00:32:17 Qu'est-ce que tu remarques ?

00:32:18 C'est un pic de gauche

00:32:19 et un pic de droite.

00:32:20 C'est un pic de gauche

00:32:21 et un pic de droite.

00:32:22 Ça veut dire quoi ?

00:32:23 C'est un pic de gauche

00:32:24 et un pic de droite.

00:32:25 Et tu vois,

00:32:26 à la base,

00:32:27 il a pris

00:32:28 cet élément,

00:32:29 il a pris

00:32:30 plus de temps

00:32:31 que cet élément

00:32:32 qui est le pic

00:32:33 de gauche.

00:32:34 Si on le regarde,

00:32:35 ça veut dire

00:32:36 que ça a pris

00:32:37 beaucoup de temps,

00:32:38 entre 5 minutes

00:32:39 et un mois.

00:32:40 Il a pris 5 minutes

00:32:41 pour qu'il sort

00:32:42 ce pic,

00:32:43 ce chimique,

00:32:44 c'est-à-dire

00:32:45 10 minutes.

00:32:46 Il a pris 5 minutes

00:32:47 pour qu'il sort

00:32:48 ce pic A.

00:32:49 Par contre,

00:32:50 ce pic,

00:32:51 ce pic A,

00:32:52 c'est un élément

00:32:53 qui est plus petit.

00:32:54 C'est un pic A,

00:32:55 c'est un pic A.

00:32:56 C'est un pic A,

00:32:57 c'est un pic A.

00:32:58 C'est un pic A,

00:32:59 c'est un pic A.

00:33:00 C'est un pic A,

00:33:01 c'est un pic A.

00:33:02 C'est un pic A,

00:33:03 c'est un pic A.

00:33:04 C'est un pic A,

00:33:05 c'est un pic A.

00:33:06 C'est un pic A,

00:33:07 c'est un pic A.

00:33:08 C'est un pic A,

00:33:09 c'est un pic A.

00:33:10 C'est un pic A,

00:33:11 c'est un pic A.

00:33:12 C'est un pic A,

00:33:13 c'est un pic A.

00:33:14 C'est un pic A,

00:33:15 c'est un pic A.

00:33:16 C'est un pic A,

00:33:17 c'est un pic A.

00:33:23 C'est un pic A,

00:33:24 c'est un pic A.

00:33:25 C'est un pic A,

00:33:26 c'est un pic A.

00:33:27 C'est un pic A,

00:33:28 c'est un pic A.

00:33:29 C'est un pic A,

00:33:30 c'est un pic A.

00:33:31 C'est un pic A,

00:33:32 c'est un pic A.

00:33:33 C'est un pic A,

00:33:34 c'est un pic A.

00:33:35 C'est un pic A,

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00:36:32 c'est un pic A.

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00:36:34 c'est un pic A.

00:36:35 C'est un pic A,

00:36:36 c'est un pic A.

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00:36:39 C'est un pic A,

00:36:40 c'est un pic A.

00:36:41 C'est un pic A,

00:36:42 c'est un pic A.

00:36:43 C'est un pic A,

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00:36:45 C'est un pic A,

00:36:46 c'est un pic A.

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00:37:11 c'est un pic A.

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00:37:54 c'est un pic A.

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00:37:58 c'est un pic A.

00:37:59 C'est un pic A,

00:38:00 c'est un pic A.

00:38:01 C'est un pic A,

00:38:02 c'est un pic A.

00:38:03 C'est un pic A,

00:38:04 c'est un pic A.

00:38:05 C'est un pic A,

00:38:06 c'est un pic A.

00:38:07 C'est un pic A,

00:38:08 c'est un pic A.

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00:38:10 c'est un pic A.

00:38:11 C'est un pic A,

00:38:12 c'est un pic A.

00:38:13 C'est un pic A,

00:38:14 c'est un pic A.

00:38:15 C'est un pic A,

00:38:16 c'est un pic A.

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00:38:18 c'est un pic A.

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00:38:20 c'est un pic A.

00:38:21 C'est un pic A,

00:38:22 c'est un pic A.

00:38:23 C'est un pic A,

00:38:24 c'est un pic A.

00:38:25 C'est un pic A,

00:38:26 c'est un pic A.

00:38:27 C'est un pic A,

00:38:28 c'est un pic A.

00:38:29 C'est un pic A,

00:38:30 c'est un pic A.

00:38:31 C'est un pic A,

00:38:32 c'est un pic A.

00:38:33 C'est un pic A,

00:38:34 c'est un pic A.

00:38:35 C'est un pic A,

00:38:41 c'est un pic A.

00:38:42 C'est un pic A,

00:38:43 c'est un pic A.

00:38:44 C'est un pic A,

00:38:45 c'est un pic A.

00:38:46 C'est un pic A,

00:38:47 c'est un pic A.

00:38:48 C'est un pic A,

00:38:49 c'est un pic A.

00:38:50 C'est un pic A,

00:38:51 c'est un pic A.

00:38:52 C'est un pic A,

00:38:53 c'est un pic A.

00:38:54 C'est un pic A,

00:38:55 c'est un pic A.

00:38:56 C'est un pic A,

00:38:57 c'est un pic A.

00:38:58 C'est un pic A,

00:38:59 c'est un pic A.

00:39:00 C'est un pic A,

00:39:01 c'est un pic A.

00:39:02 C'est un pic A,

00:39:03 c'est un pic A.

00:39:04 C'est un pic A,

00:39:05 c'est un pic A.

00:39:06 C'est un pic A,

00:39:07 c'est un pic A.

00:39:08 C'est un pic A,

00:39:09 c'est un pic A.

00:39:10 C'est un pic A,

00:39:11 c'est un pic A.

00:39:12 C'est un pic A,

00:39:13 c'est un pic A.

00:39:14 C'est un pic A,

00:39:15 c'est un pic A.

00:39:16 C'est un pic A,

00:39:17 c'est un pic A.

00:39:18 C'est un pic A,

00:39:19 c'est un pic A.

00:39:20 C'est un pic A,

00:39:21 c'est un pic A.

00:39:22 C'est un pic A,

00:39:23 c'est un pic A.

00:39:24 C'est un pic A,

00:39:25 c'est un pic A.

00:39:26 C'est un pic A,

00:39:27 c'est un pic A.

00:39:28 C'est un pic A,

00:39:34 c'est un pic A.

00:39:35 C'est un pic A,

00:39:36 c'est un pic A.

00:39:37 C'est un pic A,

00:39:38 c'est un pic A.

00:39:39 C'est un pic A,

00:39:40 c'est un pic A.

00:39:41 C'est un pic A,

00:39:42 c'est un pic A.

00:39:43 C'est un pic A,

00:39:44 c'est un pic A.

00:39:45 C'est un pic A,

00:39:46 c'est un pic A.

00:39:47 C'est un pic A,

00:39:48 c'est un pic A.

00:39:49 C'est un pic A,

00:39:50 c'est un pic A.

00:39:51 C'est un pic A,

00:39:52 c'est un pic A.

00:39:53 C'est un pic A,

00:39:54 c'est un pic A.

00:39:55 C'est un pic A,

00:39:56 c'est un pic A.

00:39:57 Donc autant de faux-cas,

00:39:58 on va garder plus la distance

00:39:59 qu'on a en cas de la distance

00:40:00 parce que du coup,

00:40:01 on s'en foutait de l'autre.

00:40:02 On s'en foutait du coup de la vitesse,

00:40:03 du déplacement.

00:40:04 C'était beaucoup plus la distance

00:40:05 mais en la fin,

00:40:06 c'est ce qu'ils vont nous donner.

00:40:07 La chromatographie sur papier

00:40:08 et sur couche mince,

00:40:09 la CCM.

00:40:10 Ici,

00:40:11 vu que c'est une colonne,

00:40:12 il y a un colonne,

00:40:13 donc il n'y a pas une distance

00:40:14 en cas de la distance.

00:40:15 Par contre,

00:40:16 en cas de la distance,

00:40:17 le temps et la vitesse

00:40:18 parce qu'ils sont liés.

00:40:19 D'accord ?

00:40:20 Le temps et la vitesse.

00:40:21 OK ?

00:40:22 À leur sortie,

00:40:23 évidemment,

00:40:24 vous avez un détecteur.

00:40:25 Un détecteur qui va faire quoi ?

00:40:26 Qui va recorder,

00:40:27 qui va enregistrer

00:40:28 où est-ce qu'il est sorti,

00:40:29 quel composé est sorti,

00:40:30 avec cet échantillon.

00:40:31 D'accord ?

00:40:32 C'est ça la chromatographie

00:40:33 en face gazeuse.

00:40:34 Mais il y a encore

00:40:35 des choses.

00:40:36 Bon,

00:40:37 ils sont liés dans la 1,

00:40:38 parce que c'est dans la 1.

00:40:39 C'est dans la 1,

00:40:40 il y a beaucoup d'éléments.

00:40:41 Je vais vous en parler

00:40:42 et vous allez comprendre.

00:40:43 La HPLC.

00:40:44 Vous avez vu la HPLC ?

00:40:45 Vous avez vu

00:40:46 que je vous ai parlé

00:40:47 de la chromatographie

00:40:48 en face gazeuse.

00:40:49 C'est la 1.

00:40:50 Vous avez vu la HPLC ?

00:40:51 Vous avez vu que je vous ai parlé

00:40:52 de la chromatographie

00:40:53 sur colonne.

00:40:54 C'est la copie et le coller.

00:40:55 C'est la copie et le coller.

00:40:56 C'est la même chose.

00:40:57 La HPLC,

00:40:58 c'est une chromatographie liquide

00:40:59 sur colonne

00:41:00 avec une haute performance.

00:41:01 Avec une haute performance,

00:41:02 on a une haute pression

00:41:03 quand on sort.

00:41:04 C'est ça la différence.

00:41:05 Vous avez vu ?

00:41:06 Vous avez vu

00:41:07 que c'est très simple à apprendre ?

00:41:08 Je vais vous montrer le schéma.

00:41:09 C'est exactement le même

00:41:10 que la moque-bêlette.

00:41:11 La seule différence,

00:41:12 c'est que la colonne,

00:41:13 la HPLC,

00:41:14 c'est la colonne.

00:41:15 C'est une colonne spéciale.

00:41:16 Cette colonne spéciale,

00:41:17 elle a des petits grains,

00:41:18 des petits grains de petite taille

00:41:19 que nous allons représenter

00:41:20 comme étant la face stationnaire.

00:41:21 La face stationnaire,

00:41:22 c'est quoi ?

00:41:23 C'est ce qui est derrière

00:41:24 la colonne.

00:41:25 Ce sont des petits grains.

00:41:26 Je ne sais pas si vous savez

00:41:27 les détails.

00:41:28 En tout cas,

00:41:29 ce sont des petits grains

00:41:30 qui vont permettre

00:41:31 de bien différencier,

00:41:32 de se faire séparer

00:41:33 ou de se faire séparer

00:41:34 de la colonne.

00:41:35 C'est ça la différence.

00:41:36 C'est la colonne spéciale.

00:41:37 C'est la colonne spéciale.

00:41:38 C'est la colonne spéciale.

00:41:39 C'est la colonne spéciale.

00:41:40 C'est la colonne spéciale.

00:41:41 Donc, on va pouvoir se séparer

00:41:45 ou se séparer

00:41:46 les composés,

00:41:47 les constituants de la colonne.

00:41:48 D'accord ?

00:41:49 La phase mobile,

00:41:50 c'est un solvant.

00:41:51 Donc, vous le savez.

00:41:52 La seule différence,

00:41:53 c'est que la pompe,

00:41:54 regardez la pompe

00:41:55 qui est en dessous.

00:41:56 C'est la pompe

00:41:57 qui va propulser le liquide.

00:41:58 La phase mobile

00:41:59 se forme liquide.

00:42:00 C'est le solvant.

00:42:01 C'est une pompe normale.

00:42:02 La HPLC,

00:42:03 c'est une pompe

00:42:04 à haute pression.

00:42:05 C'est la pompe

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00:59:39 qui va propulser

00:59:40 le liquide.

00:59:41 C'est la pompe

00:59:42 qui va propulser

00:59:43 le liquide.

00:59:44 C'est la pompe

00:59:45 qui va propulser

00:59:46 le liquide.

00:59:47 C'est la pompe

00:59:48 qui va propulser

00:59:49 le liquide.

00:59:50 C'est la pompe

00:59:51 qui va propulser

00:59:52 le liquide.

00:59:53 C'est la pompe

00:59:54 qui va propulser

00:59:55 le liquide.

00:59:56 C'est la pompe

00:59:57 qui va propulser

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00:59:59 C'est la pompe

01:00:00 qui va propulser

01:00:01 le liquide.

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01:00:30 qui va propulser

01:00:31 le liquide.

01:00:32 C'est la pompe

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01:01:45 qui va propulser

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01:02:26 C'est la pompe

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01:02:51 qui va propulser

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01:03:03 qui va propulser

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01:03:05 C'est la pompe

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01:03:07 le liquide.

01:03:08 C'est la pompe

01:03:09 qui va propulser

01:03:10 le liquide.

01:03:11 C'est la pompe

01:03:12 qui va propulser

01:03:13 le liquide.

01:03:14 C'est la pompe

01:03:15 qui va propulser

01:03:16 le liquide.

01:03:17 C'est la pompe

01:03:18 qui va propulser

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01:03:20 C'est la pompe

01:03:21 qui va propulser

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01:03:23 C'est la pompe

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01:03:26 C'est la pompe

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01:03:28 le liquide.

01:03:29 C'est la pompe

01:03:30 qui va propulser

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01:04:17 C'est la pompe

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01:04:24 qui va propulser

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01:04:28 le liquide.

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01:04:44 C'est la pompe

01:04:45 qui va propulser

01:04:46 le liquide.

01:04:47 C'est la pompe

01:04:48 qui va propulser

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01:04:50 C'est la pompe

01:04:51 qui va propulser

01:04:52 le liquide.

01:04:53 C'est la pompe

01:04:54 qui va propulser

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01:04:56 C'est la pompe

01:04:57 qui va propulser

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01:05:00 qui va propulser

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01:05:03 qui va propulser

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01:05:41 C'est la pompe

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01:05:45 qui va propulser

01:05:46 le liquide.

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01:05:58 le liquide.

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01:06:01 le liquide.

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01:06:19 le liquide.

01:06:20 C'est la pompe

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01:06:25 le liquide.

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01:06:33 qui va propulser

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01:06:56 C'est la pompe

01:06:57 qui va propulser

01:06:58 le liquide.

01:06:59 C'est la pompe

01:07:00 qui va propulser

01:07:01 le liquide.

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01:07:03 qui va propulser

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01:07:20 C'est la pompe

01:07:21 qui va propulser

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01:07:23 C'est la pompe

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01:07:26 C'est la pompe

01:07:27 qui va propulser

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01:07:29 C'est la pompe

01:07:30 qui va propulser

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01:07:36 qui va propulser

01:07:37 le liquide.

01:07:38 C'est la pompe

01:07:39 qui va propulser

01:07:40 le liquide.

01:07:41 C'est la pompe

01:07:42 qui va propulser

01:07:43 le liquide.

01:07:44 C'est la pompe

01:07:45 qui va propulser

01:07:46 le liquide.

01:07:47 Et vu que le

01:07:48 le parti

01:07:49 le parti

01:07:50 entre le pH

01:07:51 et le pH

01:07:52 est très grand

01:07:53 la distance

01:07:54 entre les 2

01:07:55 est très grande.

01:07:56 Regardez

01:07:57 comment ça a disparu.

01:07:58 Ici,

01:07:59 il y a une erreur

01:08:00 avec l'aniline et l'acide aspartic.

01:08:01 Reversez-le entre vous.

01:08:02 Reversez-le ici

01:08:03 dans le champ

01:08:04 entre l'aniline et l'acide aspartic.

01:08:05 C'est une erreur,

01:08:06 les gens.

01:08:07 Normalement,

01:08:08 c'est l'aniline

01:08:09 qui est en bleu

01:08:10 qui a disparu

01:08:11 plus que l'acide aspartic.

01:08:12 qui a disparu

01:08:13 plus que l'acide aspartic.

01:08:14 C'est l'aniline

01:08:15 qui est en bleu

01:08:16 qui a disparu

01:08:17 plus que l'acide aspartic.

01:08:18 Vous allez me dire

01:08:19 pourquoi c'est pareil.

01:08:20 Parce que

01:08:21 la différence

01:08:22 entre le pH

01:08:23 de l'aniline

01:08:24 et le pH

01:08:25 de l'aniline

01:08:26 est plus grande

01:08:27 que la différence

01:08:28 entre le pH

01:08:29 de l'aniline

01:08:30 et le pH

01:08:31 de l'acide aspartic.

01:08:32 de l'acide aspartic.

01:08:33 Et je vous ai dit

01:08:34 que la base,

01:08:35 prenez-la.

01:08:36 Vous l'avez vu

01:08:37 dans le terminal.

01:08:38 Et vous avez fait

01:08:39 comme ça

01:08:40 dans la première étape.

01:08:41 Par contre,

01:08:42 la différence

01:08:43 entre le pH

01:08:44 le pH

01:08:45 de l'aniline

01:08:46 est plus grande

01:08:47 que la différence

01:08:48 entre le pH

01:08:49 de l'acide aspartic.

01:08:50 Si le pH

01:08:51 si le pH

01:08:52 était plus petit

01:08:53 que

01:08:54 le pH

01:08:55 de l'aniline

01:08:56 de l'acide aspartic

01:08:57 et qu'est-ce qui s'est passé ?

01:08:58 Si le pH

01:08:59 était plus petit

01:09:00 que le pH

01:09:01 de l'aniline

01:09:02 de l'acide aspartic

01:09:03 et qu'est-ce qui s'est passé ?

01:09:04 Entre les 3,

01:09:05 ils ont chargé

01:09:06 comment ?

01:09:07 Ils ont chargé

01:09:08 en mode positif.

01:09:09 Vous me direz

01:09:10 pourquoi ils ont chargé

01:09:11 en mode positif.

01:09:12 Je vous expliquerai.

01:09:13 Parce que le pH

01:09:14 est plus petit

01:09:15 que le pH

01:09:16 de l'aniline d'acide aspartic.

01:09:17 Nous considérons

01:09:18 que le pH

01:09:19 de l'aniline d'acide aspartic

01:09:20 est plus petit

01:09:21 que le pH

01:09:22 de l'aniline d'acide aspartic.

01:09:23 Qu'est-ce qui s'est passé ?

01:09:24 Ils ont chargé

01:09:25 sur le cadre.

01:09:26 Et qu'est-ce qui s'est passé

01:09:27 sur le cadre ?

01:09:28 Comment est-ce qu'il a été chargé ?

01:09:29 Il y a un H2

01:09:30 et un H3+.

01:09:31 Et quand il est plus petit,

01:09:32 il est chargé

01:09:33 comment ?

01:09:34 Il est chargé

01:09:35 en mode positif.

01:09:36 Il a été chargé

01:09:37 vers le pôle négatif

01:09:38 qui est le cathode.

01:09:39 C'est pareil

01:09:40 pour le pôle négatif.

01:09:41 Il est chargé

01:09:42 vers le pôle négatif.

01:09:43 Il est chargé

01:09:44 vers le pôle négatif.

01:09:45 Il est chargé

01:09:46 vers le pôle négatif.

01:09:47 Il est chargé

01:09:48 vers le pôle négatif.

01:09:49 Il est chargé

01:09:50 vers le pôle négatif.

01:09:51 Il est chargé

01:09:52 vers le pôle négatif.

01:09:53 Il est chargé

01:09:54 vers le pôle négatif.

01:09:55 Il est chargé

01:09:56 vers le pôle négatif.

01:09:57 Il est chargé

01:09:58 vers le pôle négatif.

01:09:59 Il est chargé

01:10:00 vers le pôle négatif.

01:10:01 Il est chargé

01:10:02 vers le pôle négatif.

01:10:03 Il est chargé

01:10:04 vers le pôle négatif.

01:10:05 Il est chargé

01:10:10 vers le pôle négatif.

01:10:11 Il est chargé

01:10:12 vers le pôle négatif.

01:10:13 Il est chargé

01:10:14 vers le pôle négatif.

01:10:15 Il est chargé

01:10:16 vers le pôle négatif.

01:10:17 Il est chargé

01:10:18 vers le pôle négatif.

01:10:19 Il est chargé

01:10:20 vers le pôle négatif.

01:10:21 Il est chargé

01:10:22 vers le pôle négatif.

01:10:23 Il est chargé

01:10:24 vers le pôle négatif.

01:10:25 Il est chargé

01:10:26 vers le pôle négatif.

01:10:27 Il est chargé

01:10:28 vers le pôle négatif.

01:10:29 Il est chargé

01:10:30 vers le pôle négatif.

01:10:31 Il est chargé

01:10:32 vers le pôle négatif.

01:10:33 Il est chargé

01:10:34 vers le pôle négatif.

01:10:35 Il est chargé

01:10:36 vers le pôle négatif.

01:10:37 Il est chargé

01:10:38 vers le pôle négatif.

01:10:39 Il est chargé

01:10:40 vers le pôle négatif.

01:10:41 Il est chargé

01:10:42 vers le pôle négatif.

01:10:43 Il est chargé

01:10:44 vers le pôle négatif.

01:10:45 Il est chargé

01:10:46 vers le pôle négatif.

01:10:47 Il est chargé

01:10:48 vers le pôle négatif.

01:10:49 Il est chargé

01:10:50 vers le pôle négatif.

01:10:51 Il est chargé

01:10:52 vers le pôle négatif.

01:10:53 Il est chargé

01:10:54 vers le pôle négatif.

01:10:55 Il est chargé

01:10:56 vers le pôle négatif.

01:10:57 Il est chargé

01:10:58 vers le pôle négatif.

01:10:59 Il est chargé

01:11:04 vers le pôle négatif.

01:11:05 Il est chargé

01:11:06 vers le pôle négatif.

01:11:07 Il est chargé

01:11:08 vers le pôle négatif.

01:11:09 Il est chargé

01:11:10 vers le pôle négatif.

01:11:11 Il est chargé

01:11:12 vers le pôle négatif.

01:11:13 Il est chargé

01:11:14 vers le pôle négatif.

01:11:15 Il est chargé

01:11:16 vers le pôle négatif.

01:11:17 Il est chargé

01:11:18 vers le pôle négatif.

01:11:19 Il est chargé

01:11:20 vers le pôle négatif.

01:11:21 Il est chargé

01:11:22 vers le pôle négatif.

01:11:23 Il est chargé

01:11:24 vers le pôle négatif.

01:11:25 Il est chargé

01:11:26 vers le pôle négatif.

01:11:27 Il est chargé

01:11:28 vers le pôle négatif.

01:11:29 Il est chargé

01:11:30 vers le pôle négatif.

01:11:31 Il est chargé

01:11:32 vers le pôle négatif.

01:11:33 Il est chargé

01:11:34 vers le pôle négatif.

01:11:35 Il est chargé

01:11:36 vers le pôle négatif.

01:11:37 Il est chargé

01:11:38 vers le pôle négatif.

01:11:39 Il est chargé

01:11:40 vers le pôle négatif.

01:11:41 Il est chargé

01:11:42 vers le pôle négatif.

01:11:43 Il est chargé

01:11:44 vers le pôle négatif.

01:11:45 Il est chargé

01:11:46 vers le pôle négatif.

01:11:47 Il est chargé

01:11:48 vers le pôle négatif.

01:11:49 Il est chargé

01:11:50 vers le pôle négatif.

01:11:51 Il est chargé

01:11:52 vers le pôle négatif.

01:11:53 Il est chargé

01:11:58 vers le pôle négatif.

01:11:59 Il est chargé

01:12:00 vers le pôle négatif.

01:12:01 Il est chargé

01:12:02 vers le pôle négatif.

01:12:03 Il est chargé

01:12:04 vers le pôle négatif.

01:12:05 Il est chargé

01:12:06 vers le pôle négatif.

01:12:07 Il est chargé

01:12:08 vers le pôle négatif.

01:12:09 Il est chargé

01:12:10 vers le pôle négatif.

01:12:11 Il est chargé

01:12:12 vers le pôle négatif.

01:12:13 Il est chargé

01:12:14 vers le pôle négatif.

01:12:15 Il est chargé

01:12:16 vers le pôle négatif.

01:12:17 Il est chargé

01:12:18 vers le pôle négatif.

01:12:19 Il est chargé

01:12:20 vers le pôle négatif.

01:12:21 Il est chargé

01:12:22 vers le pôle négatif.

01:12:23 Il est chargé

01:12:24 vers le pôle négatif.

01:12:25 Il est chargé

01:12:26 vers le pôle négatif.

01:12:27 Il est chargé

01:12:28 vers le pôle négatif.

01:12:29 Il est chargé

01:12:30 vers le pôle négatif.

01:12:31 Il est chargé

01:12:32 vers le pôle négatif.

01:12:33 Il est chargé

01:12:34 vers le pôle négatif.

01:12:35 Il est chargé

01:12:36 vers le pôle négatif.

01:12:37 Il est chargé

01:12:38 vers le pôle négatif.

01:12:39 Il est chargé

01:12:40 vers le pôle négatif.

01:12:41 Il est chargé

01:12:42 vers le pôle négatif.

01:12:43 Il est chargé

01:12:44 vers le pôle négatif.

01:12:45 Il est chargé

01:12:46 vers le pôle négatif.

01:12:47 Il est chargé

01:12:52 vers le pôle négatif.

01:12:53 Il est chargé

01:12:54 vers le pôle négatif.

01:12:55 Il est chargé

01:12:56 vers le pôle négatif.

01:12:57 Il est chargé

01:12:58 vers le pôle négatif.

01:12:59 Il est chargé

01:13:00 vers le pôle négatif.

01:13:01 Il est chargé

01:13:02 vers le pôle négatif.

01:13:03 Il est chargé

01:13:04 vers le pôle négatif.

01:13:05 Il est chargé

01:13:06 vers le pôle négatif.

01:13:07 Il est chargé

01:13:08 vers le pôle négatif.

01:13:09 Il est chargé

01:13:10 vers le pôle négatif.

01:13:11 Il est chargé

01:13:12 vers le pôle négatif.

01:13:13 Il est chargé

01:13:14 vers le pôle négatif.

01:13:15 Il est chargé

01:13:16 vers le pôle négatif.

01:13:17 Il est chargé

01:13:18 vers le pôle négatif.

01:13:19 Il est chargé

01:13:20 vers le pôle négatif.

01:13:21 Il est chargé

01:13:22 vers le pôle négatif.

01:13:23 Il est chargé

01:13:24 vers le pôle négatif.

01:13:25 Il est chargé

01:13:26 vers le pôle négatif.

01:13:27 Il est chargé

01:13:28 vers le pôle négatif.

01:13:29 Il est chargé

01:13:30 vers le pôle négatif.

01:13:31 Il est chargé

01:13:32 vers le pôle négatif.

01:13:33 Il est chargé

01:13:34 vers le pôle négatif.

01:13:35 Il est chargé

01:13:36 vers le pôle négatif.

01:13:37 Il est chargé

01:13:38 vers le pôle négatif.

01:13:39 Il est chargé

01:13:40 vers le pôle négatif.

01:13:41 Il est chargé

01:13:46 vers le pôle négatif.

01:13:47 Il est chargé

01:13:48 vers le pôle négatif.

01:13:49 Il est chargé

01:13:50 vers le pôle négatif.

01:13:51 Il est chargé

01:13:52 vers le pôle négatif.

01:13:53 Il est chargé

01:13:54 vers le pôle négatif.

01:13:55 Il est chargé

01:13:56 vers le pôle négatif.

01:13:57 Il est chargé

01:13:58 vers le pôle négatif.

01:13:59 Il est chargé

01:14:00 vers le pôle négatif.

01:14:01 Il est chargé

01:14:02 vers le pôle négatif.

01:14:03 Il est chargé

01:14:04 vers le pôle négatif.

01:14:05 Il est chargé

01:14:06 vers le pôle négatif.

01:14:07 Il est chargé

01:14:08 vers le pôle négatif.

01:14:09 Il est chargé

01:14:10 vers le pôle négatif.

01:14:11 Il est chargé

01:14:12 vers le pôle négatif.

01:14:13 Il est chargé

01:14:14 vers le pôle négatif.

01:14:15 Il est chargé

01:14:16 vers le pôle négatif.

01:14:17 Il est chargé

01:14:18 vers le pôle négatif.

01:14:19 Il est chargé

01:14:20 vers le pôle négatif.

01:14:21 Il est chargé

01:14:22 vers le pôle négatif.

01:14:23 Il est chargé

01:14:24 vers le pôle négatif.

01:14:25 Il est chargé

01:14:26 vers le pôle négatif.

01:14:27 Il est chargé

01:14:28 vers le pôle négatif.

01:14:29 Il est chargé

01:14:30 vers le pôle négatif.

01:14:31 Il est chargé

01:14:32 vers le pôle négatif.

01:14:33 Il est chargé

01:14:34 vers le pôle négatif.

01:14:35 Il est chargé

01:14:40 vers le pôle négatif.

01:14:41 Il est chargé

01:14:42 vers le pôle négatif.

01:14:43 Il est chargé

01:14:44 vers le pôle négatif.

01:14:45 Il est chargé

01:14:46 vers le pôle négatif.

01:14:47 Il est chargé

01:14:48 vers le pôle négatif.

01:14:49 Il est chargé

01:14:50 vers le pôle négatif.

01:14:51 Il est chargé

01:14:52 vers le pôle négatif.

01:14:53 Il est chargé

01:14:54 vers le pôle négatif.

01:14:55 Il est chargé

01:14:56 vers le pôle négatif.

01:14:57 Il est chargé

01:14:58 vers le pôle négatif.

01:14:59 Il est chargé

01:15:00 vers le pôle négatif.

01:15:01 Il est chargé

01:15:02 vers le pôle négatif.

01:15:03 Il est chargé

01:15:04 vers le pôle négatif.

01:15:05 Il est chargé

01:15:06 vers le pôle négatif.

01:15:07 Il est chargé

01:15:08 vers le pôle négatif.

01:15:09 Il est chargé

01:15:10 vers le pôle négatif.

01:15:11 Il est chargé

01:15:12 vers le pôle négatif.

01:15:13 Il est chargé

01:15:14 vers le pôle négatif.

01:15:15 Il est chargé

01:15:16 vers le pôle négatif.

01:15:17 Il est chargé

01:15:18 vers le pôle négatif.

01:15:19 Il est chargé

01:15:20 vers le pôle négatif.

01:15:21 Il est chargé

01:15:22 vers le pôle négatif.

01:15:23 Il est chargé

01:15:24 vers le pôle négatif.

01:15:25 Il est chargé

01:15:26 vers le pôle négatif.

01:15:27 Il est chargé

01:15:28 vers le pôle négatif.

01:15:29 Il est chargé

01:15:30 vers le pôle négatif.

01:15:31 Il est chargé

01:15:32 vers le pôle négatif.

01:15:33 Il est chargé

01:15:34 vers le pôle négatif.

01:15:35 Il est chargé

01:15:36 vers le pôle négatif.

01:15:37 Il est chargé

01:15:38 vers le pôle négatif.

01:15:39 Il est chargé

01:15:40 vers le pôle négatif.

01:15:41 Il est chargé

01:15:42 vers le pôle négatif.

01:15:43 Il est chargé

01:15:44 vers le pôle négatif.

01:15:45 Il est chargé

01:15:46 vers le pôle négatif.

01:15:47 Il est chargé

01:15:48 vers le pôle négatif.

01:15:49 Il est chargé

01:15:50 vers le pôle négatif.

01:15:51 Il est chargé

01:15:52 vers le pôle négatif.

01:15:53 Il est chargé

01:15:54 vers le pôle négatif.

01:16:00 Il est chargé

01:16:01 vers le pôle négatif.

01:16:02 Il est chargé

01:16:03 vers le pôle négatif.

01:16:04 Il est chargé

01:16:05 vers le pôle négatif.

01:16:06 Il est chargé

01:16:07 vers le pôle négatif.

01:16:08 Il est chargé

01:16:09 vers le pôle négatif.

01:16:10 Il est chargé

01:16:11 vers le pôle négatif.

01:16:12 Il est chargé

01:16:13 vers le pôle négatif.

01:16:14 Il est chargé

01:16:15 vers le pôle négatif.

01:16:16 Il est chargé

01:16:17 vers le pôle négatif.

01:16:18 Il est chargé

01:16:19 vers le pôle négatif.

01:16:20 Il est chargé

01:16:21 vers le pôle négatif.

01:16:22 Il est chargé

01:16:23 vers le pôle négatif.

01:16:24 Il est chargé

01:16:25 vers le pôle négatif.

01:16:26 Il est chargé

01:16:27 vers le pôle négatif.

01:16:28 Il est chargé

01:16:29 vers le pôle négatif.

01:16:30 Il est chargé

01:16:31 vers le pôle négatif.

01:16:32 Il est chargé

01:16:33 vers le pôle négatif.

01:16:34 Il est chargé

01:16:35 vers le pôle négatif.

01:16:36 Il est chargé

01:16:37 vers le pôle négatif.

01:16:38 Il est chargé

01:16:39 vers le pôle négatif.

01:16:40 Il est chargé

01:16:41 vers le pôle négatif.

01:16:42 Il est chargé

01:16:43 vers le pôle négatif.

01:16:44 Il est chargé

01:16:45 vers le pôle négatif.

01:16:46 Il est chargé

01:16:47 vers le pôle négatif.

01:16:48 Il est chargé

01:16:53 vers le pôle négatif.

01:16:54 Il est chargé

01:16:55 vers le pôle négatif.

01:16:56 Il est chargé

01:16:57 vers le pôle négatif.

01:16:58 Il est chargé

01:16:59 vers le pôle négatif.

01:17:00 Il est chargé

01:17:01 vers le pôle négatif.

01:17:02 Il est chargé

01:17:03 vers le pôle négatif.

01:17:04 Il est chargé

01:17:05 vers le pôle négatif.

01:17:06 Il est chargé

01:17:07 vers le pôle négatif.

01:17:08 Il est chargé

01:17:09 vers le pôle négatif.

01:17:10 Il est chargé

01:17:11 vers le pôle négatif.

01:17:12 Il est chargé

01:17:13 vers le pôle négatif.

01:17:14 Il est chargé

01:17:15 vers le pôle négatif.

01:17:16 Il est chargé

01:17:17 vers le pôle négatif.

01:17:18 Il est chargé

01:17:19 vers le pôle négatif.

01:17:20 Il est chargé

01:17:21 vers le pôle négatif.

01:17:22 Il est chargé

01:17:23 vers le pôle négatif.

01:17:24 Il est chargé

01:17:25 vers le pôle négatif.

01:17:26 Il est chargé

01:17:27 vers le pôle négatif.

01:17:28 Il est chargé

01:17:29 vers le pôle négatif.

01:17:30 Il est chargé

01:17:31 vers le pôle négatif.

01:17:32 Il est chargé

01:17:33 vers le pôle négatif.

01:17:34 Il est chargé

01:17:35 vers le pôle négatif.

01:17:36 Il est chargé

01:17:37 vers le pôle négatif.

01:17:38 Il est chargé

01:17:39 vers le pôle négatif.

01:17:40 Il est chargé

01:17:41 vers le pôle négatif.

01:17:42 Il est chargé

01:17:47 vers le pôle négatif.

01:17:48 Il est chargé

01:17:49 vers le pôle négatif.

01:17:50 Il est chargé

01:17:51 vers le pôle négatif.

01:17:52 Il est chargé

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01:18:09 vers le pôle négatif.

01:18:10 Il est chargé

01:18:11 Et à la prochaine !

01:18:13 à tout le monde.

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